По образному выражению проф. А. А. Жуховицкого, «открытие хроматографии можно сравнить с созданием микроскопа. Благодаря ей открылся новый, неведомый ранее мир многих компонентов, примесей и микропримесей». В настоящее время она заняла ведущее место среди методов анализа сложных смесей, и трудно найти область естественных наук, в которой бы не использовались достижения хроматографии. При этом часто забывают, что хроматография — это прежде всего мощный метод разделения, реализующий малейшие различия в физико-химических свойствах компонентов системы благодаря многократному повторению процессов распределения веществ при их движении по колонке.
Быстрое развитие современной аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) позволило решить многие проблемы новейших областей знаний. С самого начала развития ВЭЖХ стало ясно, что она обладает рядом уникальных свойств, определяющих возможности ее использования для препаративных и технологических целей: простое масштабирование без потери эффективности, слабая зависимость эффективности от скорости потока, позволяющая получать производительности, сопоставимые с нуждами технологии, легкая перенастраивае-мость, дающая возможность по-новому подходить к организации технологических процессов разделения, и т. д. — все это привела к тому, что в последние годы началось бурное развитие препаративной жидкостной хроматографии, по своим разделительным возможностям мало уступающей аналитической ВЭЖХ.
Предлагаемая читателю книга является первой монографией, посвященной препаративной жидкостной хроматографии. Книга написана коллективом авторов, являющихся специалистами в соответствующих областях препаративной хроматографии.
Наиболее систематизированные и полные сведения о принципах препаративной хроматографии, практических шагах по ее использованию для решения стоящих перед исследователем задач приведены в гл. 1—3. Последующие главы поссящены вопросам использования жидкостной препаративной хроматографии в фармацевтической промышленности, органической химии, биохимии, при разделении энантиомеров, полимеров.
Книга не содержит глубоких теоретических сведений о процессах хроматографического разделения, но дает ясное качественное понимание основных взаимосвязей между величинами, влияющими на процессы разделения.
Оглавление
От переводчика............... 5
Предисловие................ 7
1. Принципы препаративной жидкостной хроматографии.
П. Макдональд, Б. Бидлингмейер...... 9
1.1. Введение............... 9
1.2. Планирование разделения........... Ю
1.2.1. Постановка проблемы........... 10
1.2.1.1. Препаративное или аналитическое разделение? ... 10
1.2.1.2. Природа образца........... 13
1.2.1.3. Практические соображения........ 14
1.2.2. Выбор цели разделения...... .... 14
1.2.3. План препаративного ЖХ-разделения...... 16
1.3. Достижение разделения........... 19
1.3.1. Коэффициент разделения а......... 19
1.3.2. Число тарелок N............ 22
1.3.3. Зависимость разрешения от а и N........ 25
1.3.4. Степень разделения, необходимая в препаративной ЖХ . . 26
1.4. Нагрузка колонки............. 27
1.4.1. Нагрузка или перегрузка?.......... 27
1.4.2. Качественная модель нагрузки колонки...... 29
J.4.3. Соотношение между параметрами разделения и нагрузкой 34
1.4.3.1. Нагрузка и а............ 34
1.4.3.2. Нагрузка и эффективность........ 36
1.4.3.3. Нагрузка и время удерживания....... 39
1.4.3.4. Нагрузка в циркуляционном методе...... 42
1.4.4. Влияние нагрузки на форму пика........ 49
1.4.4.1. Изменение формы пика с увеличением нагрузки ... 49
1.4.4.2. Дополнительные причины искажения формы гауссова пика 53
1.5. Масштабирование разделения.......... 56
1.5.1. Масштабирование на основе аналитической ЖХ ... 56
1.5.1.1. Общие соображения........... 56
1.5.1.2. Пример последовательного подхода к масштабированию 57
1.5.2. Масштабирование на основе данных ТСХ..... 63
1.5.3. Масштабирование разделения с градиентным элюированием 67
1.6. Выбор препаративной системы разделения с учетом материалов
для насадки и элюентов............ 70
1.6.1. Неподвижная фаза............ 70
1.6.1.1. Химические свойства неподвижной фазы..... 71
1.6.1.2. Физические свойства.......... 79
1.6.2. Подвижная фаза............ 85
1.6.2.1. Химические и физические свойства....... 85
1.6.2.2. Практические советы.......... 93
1.6.2.3. Техника безопасности.......... 104
1.7. Системы для препаративной ЖХ.........
1.7.1. Колонка для препаративной ЖХ........
1.7.1.1. Конструкция колонки..........
1.7.1.2. Структура насадки..........
1.7.2. Система подачи элюента и введения образца.....
1.7.2.1. Сопоставление турбулентного и ламинарного потоков
1.7.2.2. Циркуляционные системы.........
1.7.3. Детектирование.............
1.7.4. Сбор образцов и их извлечение.......
1.7.5. Автоматизация.............
1.8. Заключение...............
Литература...............
2. Препаративная тонкослойная хроматография. И. Шерма, Б. Фрайд.............
2.1. Введение.....
2.2. Слои для ПТСХ . . .
2.3. Нанесение образца
2.4. Проявление ....
2.5. Детектированеи зон
2.6. Удаление веществ из слоя
2.7. Применение ПТСХ . .
2.7.1. Жиры и липиды........
2.7.2. Лекарства и фармацевтические препараты
2.7.3. Красители и пигменты...........
2.7.4. Разные соединения............
2.8. Перенесение результатов ТСХ на препаративную жидкостную хроматографию ...............
Литература...............
3. Увеличение эффективности в крупномасштабной хроматографии. Ф. Ванкат ........
3.1. Введение................
3.2. Неэффективность препаративной элюентной хроматографии
3.3. Противоточные системы............
3.4. Системы с псевдодвижущимися слоями.......
3.5. Гибридные методы. Комбинация системы с псевдодвижущимся слоем и элюентной хроматографии...... ...
3.6. Другие методы крупномасштабной хроматографиг
3.7. Принятые обозначения............
Литература................
4. Препаративная жидкостная хроматография в фармацевтической промышленности. А. Верли.....
4.1. Введение................
4.2. Главные области применения препаративной ЖХ в фармацевти-ческой_промышленности
104 106 106 ПО
112 114 115 117 119 120 120 122
131
131 132 134 137 139 141 144 144 147 148 149
149 152
155 155 156 159 163
169 172 172 174
4.2.1. Препаративная ЖХ в поиске новых лекарственных веществ
4.2.2. Препаративная ЖХ при биологических испытаниях . -494 препаРативная ЖХ при исследовании стабильности лекарств
44 тл иРепаРативная жидкостная хроматография в производстве л Используемые хроматографические системы ....
T'q о Адсорбционная хроматография
; о о Р°матограсрия на привитых фазах
!QO о-°иращенно"фазная хроматография ' .....
, Q о Л н°Рмальн°-фазная хроматография . . .
4.сЫ. Ионообменная хроматография
177
177
177
177
178
179
179
180
180
181
181
181
182
4.3.4. Ситовая хроматография и другие методы...... 182*
4.4. Аппаратура и примеры............ 182
: 4.4.1. Препаративная ЖХ аналитического масштаба (миллиграммы) 182
-• 4.4.1.1. Приборы.............. 182'
4.4.1.2. Примеры............. 183_
4.4.2. Препаративная ЖХ лабораторного масштаба (граммы) . . 187" 1 4.4.2.1. Приборы.............. 187
4.4.2.2. Примеры............. 191
4.4.2.3. Некоторые тенденции в препаративной ЖХ лабораторного масштаба............... 196-
4.4.3. Препаративная ЖХ промышленного масштаба . . . . 199'
4.4.3.1. Аппаратура............. 199
4.4.3.2. Примеры.............. 201
4.5. Заключение............... 202
Литература................ 203
5. Препаративная жидкостная хроматография для химика-синтетика. Дж. Уайт се лл........ 206»
5.1. Введение................ 206
5.2. Моделирование на ЭВМ........... 210
5.3. Реальные системы............. 221
5.4. Практические вопросы............ 225-
Литература................ 226
6. Применение препаративной жидкостной хроматографии в биохимии. У. Хэнкок, Р. Престидж...... 227"
6.1. Введение................ 227
6.2. Общие требования к разделению аминокислот и полипептидов 228
6.2.1. Природа неподвижной фазы......... 228-
6.2.2. Природа подвижной фазы.......... 229
6.2.3. Природа органического модификатора....... 233
6.2.4. Некоторые комментарии о препаративном разделении . . 234
6.3. Препаративное разделение аминокислот и пептидов .... 234
6.4. Применение тонкослойной хроматографии в обращенной фазе для контроля препаративного разделения ........ 245-
6.5. Препаративное разделение белков......... 247
6.5.1. Разделение в обращенной фазе......... 247
6.5.2. Прочие способы разделения......... 253
6.6. Другие классы биохимических соединений...... 254
Литература ............... 255
7. Прямое препаративное разделение энантиомеров жидкостной хроматографией на хиральных неподвижных фазах. У. Пиркл, Б. Хемпер......... 258;
7.1. Введение............... 258
7.2. Хроматографические методы выделения энантиомеров . . . 259
7.3. Хроматографические свойства хиральной неподвижной фазы (ХНФ)................. 262
7.4. ХНФ на основе природных материалов....... 265
7.4.1. Микрокристаллическая триацетилцеллюлоза..... 265-
7.4.2. Картофельный крахмал.......... 269
7.5. Синтетические ХНФ............ 270
7.5.1. Разработка рационально сконструированных ХНФ . . . 270
7.5.2. Хиральные краун-эфиры.......... 271
7.5.3. Карбинольные ХНФ........... 274
; 7.5.4. Аминокислотные ДНБ........... 275-
: 7.5.5. Хиральные винилполимеры.......... 286-
7.5.6. Полиамидные ХНФ............ 289
7.5.7. Циклодекстриновые полимеры......... 291
7.5.8. ХНФ 58............... 292
7.5.9. Лигандообменная хроматография........ 293
7.5.10. Прочие методы жидкостной хроматографии..... 297
7.6. Заключение............... 300
7.7. Дополнения............... 301
Литература............... 304
8. Препаративная ситовая хроматография.Г. Хегнауер . 308
8.1. Введение............ ... 308
8.2. Оборудование, колонки и материалы для заполнеавя колонок 311
8.3. Общие требования и специальные методы ... ... 314
8.3.1. Подвижная фаза—элюент.......... 314
8.3.2. Подготовка образца............ 317
8.3.3. Емкость для растворителя.......... 318
8.3.4. Система подачи растворителя......... 319
8.3.5. Узел ввода пробы (дозатор)......... 319
8.3.6. Колонки и материалы для заполнения колонок .... 320
8.3.7. Детектирующая система.......... 323
8.3.8. Сбор фракций и выделение веществ....... 325
8.3.9. Повторное разделение и методы циркуляции..... 326
8.3.10. Регулирование температуры......... 328
8.4. Оптимизация препаративного разделения....... 329
8.5. Применение............... 340
Литература................ 346
Предметный указатель.............. 350
Цена: 150руб.
