Глава 1. Основные типы хроматографии. О. МИКЕШ ..... ц
1.1. Современные методы разделения......... 11
Краткая история развития современных методов разделения . 13
1.2. Классификация хроматографических методов в соответствии с принципом процесса разделения......... 21
1.2.1. Адсорбционная хроматография......... 22
1.2.2. Распределительная хроматография....... 23
1.2.3. Ионообменная хроматография......... 24
1.2.4. Гель-хроматография............ 25
1.2.5. Аффинная хроматография.......... 26
1.2.6. Другие типы хроматографии......... 27
1.3. Классификация хроматографических методов по способу разделения................. 28
1.3.1. Фронтальный анализ........... 28
1.3.2. Вытеснительная хроматография........ 29
1.3.3. Проявительная (элюентная) хроматография..... 31
1.3.4. Другие типы классификации по способу разделения ... 34
1.4. Современная классификация типов хроматографии по характеру
фаз, между которыми совершается процесс фракционирования 35
1.4.1. Жидкостная хроматография......... 35
1.4.2. Газовая хроматография........... 35
1.5. Другие типы классификации хроматографических методов . . 37 Литература................ 38
Глава 2. Теория хроматографии. И. НОВАК........ 39
2.1. Введение................ 39
2.2. Общее описание хроматографического процесса..... 40
2.2.1. Материальный баланс растворенного вещества в хроматогра-фической системе............ 40
2.2.2. Модель идеального линейного хроматографического процесса 45
2.2.3. Уравнения удерживания.......... 46
2.3. Рациональное описание модели неидеального линейного хроматографического процесса........... 47
2.3.1. Расширение хроматографической зоны...... 47
2.3.2. Понятие «теоретическая тарелка»........ 50
2.4. Течение подвижной фазы........... 51
2.5. Сорбционное равновесие и константа распределения ... 52
2.6. Хроматографическое разделение......... 55
Литература................ 56
Глава 3. Бумажная хроматография. 3. ПРОХАЗКА, К. ШЕБЕСТА,
В. ТОМАШЕК ................ 58
3.1. Введение................ 58
3.1.1. Хроматографическая бумага......... 59
3.1.2. Аппаратура для бумажной хроматографии..... 62
Хроматографические камеры и вспомогательные приспособления 62
Приспособления для сушки хроматограмм....... "6
Пипетки для нанесения проб.......... 67
Аппаратура для обнаружения.......... 68
Измерение значения Rf............ 69
Аппаратура для элюирования пятен........ 70
3.1.3. Выбор растворителей (подвижной фазы)...... 71
3.1.4. Определение величин Rf и RM, их измерение и применение 78
3.2. Техника работы.............. 87
3.2.1. Приготовление пробы........... 87
3.2.2. Нанесение пробы............ 88
3.2.3. Обращение с хроматограммами и элюирование их . . 89
3.2.4. Сушка............... 94
3.2.5. Обнаружение.............. 94
3.2.6. Экстрагирование хроматографических зон...... 96
3.2.7. Хранение хроматограмм и оформление полученных данных 97
3.3. Препаративная бумажная хроматография....... 97
3.4. Количественная бумажная хроматография....... 98
3.5. Бумажная хроматография органических кислородсодержащих соединений............... 100
3.5.1. Спирты.............. 101
3.5.2. Сахара............... 103
3.5.3. Альдегиды и кетоны........... 109
3.5.4. Кислоты............... 110
3.5.5. Фенолы, флавоноиды, кумарины........ 114
3.5.6. Стероиды и терпеноиды.......... 117
3.5.7. Другие кислородсодержащие соединения...... 119
3.6. Бумажная хроматография органических азотсодержащих соединений ................. 121
3.6.1. Бумажная хроматография аминокислот и пептидов. В. То-
машек............... 121
-Г" Обнаружение аминокислот и пептидов........ 125
Специфические способы обнаружения........ 125
3.6.2. Компоненты нуклеиновых кислот. К. Шебеста .... 127
3.6.3. Алкалоиды.............. 128
3.6.4. Индолы............... 130
3.6.5. Амины............... 133
3.6.6. Нитросоединения............. 134
3.7. Бумажная хроматография соединений, содержащих другие ге-тероатомы............... 135
3.7.1. Серусодержащие соединения......... 135
3.7.2. Органические соединения фосфора........ 136
3.8. Витамины................ 137
3.9. Антибиотики............... 139
3.10. Другие органические соединения......... 141
3.11. Бумажная хроматография неорганических соединений. М. Гейт-манек................. 142
3.11.1. Примеры разделения и обнаружения катионов .... 143
Щелочные металлы............. 143
Щелочноземельные металлы.......... 144
Никель, кобальт, медь............ 144
Ниобий и тантал.............. 145
Редкоземельные металлы........... 145
Торий, уран, лантан............. 145
Выделение одного или двух элементов из смеси..... 146
3.11.2. Примеры разделения и обнаружения анионов .... 146
Галогениды............... 146
Хлорид, хлорит, хлорат и перхлорат........ 146
Фосфаты................ 146
3.12. Колонки с целлюлозой............ 147
Литература................ 148
Глава 4. Адсорбционная колоночная хроматография. О. МОТЛ, Л. НОВОТНЫЙ ............... . . 152
4.1. Введение................ J52
4.2. Адсорбенты.............., ]5з
4.2.1. Общие свойства адсорбентов........_ J53
4.2.2. Силикагель............._ Ig0
Приготовление макропористого силикагеля с применением ка-
тионообменника [54]............ 162
Деление адсорбента на фракции по размерам частиц .... 163
Приготовление силикагеля, пропитанного нитратом серебра . . 164
Регенерация силикагеля ............ 165
4.2.3. Оксид алюминия............ 165
Определение активности оксида алюминия методом ТСХ . . . 167
Пропитка оксида алюминия нитратом серебра..... 169
4.2.4. Силикат магния флоризил.......... 169
4.2.5. Оксид магния............. 169
4.2.6. Древесный уголь............ 170
4.2.7. Полиамиды.............. 171
Определение сорбционной активности полиамидного порошка . . 173 Один из способов получения дешевого адсорбента с нужным размером частиц [77]............. 174
4.2.8. Полистирольные адсорбенты......... 175
Подготовка амберлита XAD-2 (0,3—1 мм)...... 176
4.2.9. Адсорбенты для жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД)............. 177
4.2.10. Реакции на адсорбентах.......... 182
4.3. Подвижная фаза............. 184
4.4. Техника хроматографирования.......... 188
4.4.1. Выбор метода хроматографии......... 188
4.4.2. Колонки и заполнение их адсорбентом...... 189
Техника заполнения колонок .......... 190
4.4.3. Методика подбора элюирующей системы...... 193
4.4.4. Методика хроматографии и оценка результатов .... 195
Классическая колоночная хроматография....... 195
Жидкостная хроматография высокого давления (высокоэффективная жидкостная хроматография)........ 197
4.5. Примеры разделения методом адсорбционной хроматографии ряда органических соединений .......... 200
4.5.1. Разделение сесквитерпенов, содержащихся в корневищах Se-necio nemorensis fuchsii [53]......... 200
4.5.2. Экстракция и хроматографическое разделение в инертной атмосфере............... 201
4.5.3. Хроматография в колонке, заполненной ионообменником в Ае+-форме.............. 205
Приготовление насадки ............ ^и'
4.5.4. Разделение гликозидов каротиноидов на оксиде магния . . 208
4.5.5. Разделение корриноидов методом проявительной хроматографии на неполярном адсорбенте амберлит XAD-2 . . . 209
4.5.6. Жидко-твердофазная хроматография высокого давления на классических и поверхностно-пористых сорбентах . . . 210
4.5.7. Препаративная жидкостная хроматография высокого давления ................ 21о
4.5.8. Жидкостная хроматография высокого давления с использованием химически связанных неподвижных фаз .... ^
Литература................ 219
Глава 5. Ионообменная хроматография. О. МИКЕШ, К. ШЕБЕСТА 222 5.1. Введение . . ,............ . 222
5.1.1. Что такое ионообменники?..........222
5.1.2. Классификация ионообменников по их природе и по химиче скому составу матоипы
скому составу матрицы 5.1.3. КлассиЛикяттич илчллй.ж.
223 223 226 229 229 231
5.1.3. Классификация ионообменников по ионогенным группам .
5.1.4. Классификация по форме и состоянию......
5.2. Структура ионитов. Я. Штамберг........
5.2.1. Неорганические иониты......... .
5.2.2. Ионообменные смолы........... ___
5.2.3. Иониты на основе целлюлозы......... 234
5.2.4. Иониты на основе производных полидекстрана и агарозы 235
5.2.5. Ионообменные материалы других типов ...... 236
5.2.6. Физическая структура гранулированных ионитов .... 236
5.3. Природа сорбционных процессов......... 238
5.3.1. Ионный обмен............. 238
5.3.2.'Процессы, сопровождающие ионный обмен..... 239
5.3.3. Сорбция амфотерных ионов. О. Микеш...... 241
5.4. Основы ионообменной хроматографии. Я. Штамберг .... 242
5.4.1. Хроматография низкомолекулярных соединений .... 242
5.4.2. Хроматография белков. О. Микеш........ 244
5.5. Основные характеристики ионитов. Я- Штамберг .... 245
5.5.1. Обменная емкость........... . 246
5.5.2. Кривые титрования........... . 247
5.5.3. Плотность и набухаемость........: , 249
5.5.4.-Размер и-форма • частиц.......... 250
5.6. Подготовка ионитов к хроматографическому процессу, их регенерирование и хранение........... 251
5.6.1. Выбор ионита............. 251
5.6.2. Декантация и набухание.......... 267
5.6.3. Фракционирование частиц по размерам в лаборатории . . 268
5.6.4. Предварительная обработка ионита....... 268
5.6.5. Выбор буферов и буферирование ионитов...... 270
5.6.6. Регенерация и хранение ионитов........ 272
.5.7. Хроматография.............. 273
5.7.1. Хроматографические колонки и их емкость..... 273
5.7.2. Заполнение колонки ионитом и контроль за приведением ионита к равновесию . , ; ........ 275
5.7.3. Ввод пробы в колонку '.'.'.".'....... 277
5.7.4. Методы элюирования и скорость элюирования .... 278
5.7.5. Размер отбираемых фракций и анализ фракций .... 280
5.7.6. Пересчет параметров при использовании разных колонок 281 5.8. Примеры использования ионитов для разделения смесей неорганических веществ. М. Гейтманек......... 282
5.8.1. Нехроматографические процессы........ 282
Умягчение воды.............. 283
Деминерализация воды............ 283
Определение полной концентрации солей ....... 284
Исключение мешающих ионов.......... 285
Накопление следовых ионов .......... 286
5.8.2. Хроматография катионов......... 286
Щелочные металлы............. 287
Ионы щелочноземельных металлов и другие катионы . . . 287
5.8.3. Хроматография анионов........... ?яя
.5.8.4. Ионный обмен с участием растворов комплексных солей при
.применении смесей растворителей........
288 290
Разделение переходных металлов......... 290
Разделение мышьяка, сурьмы и олова........ 292
Разделение многозарядных ионов......... 293
5.9. Примеры разделений органических соединений. Я. Штамберг 294
5.9.1. Хроматография на сильнодиссоциированных ионитах ... 294
5.9.2. Хроматография на ионитах модифицированной структуры 299
5.9.3. Хроматография на полимерных сорбентах...... 303
5.10. Применение ионитов в биохимии. О. Микеш, К- Шебеста . . 304
5.10.1. Аминокислоты............. 305
5.10.2. Пептиды.............. 312
5.10.3. Белки............... 316
5.10.4. Фрагменты оболочек клеток микробов...... 321
5.10.5. Антибиотики............. 322
5.10.6. Витамины.............. 325
5.10.7. Основания, нуклеозиды, нуклеотиды и нуклеиновые кислоты 327 Литература................ 333
Глава 6. Гель-хроматография. В. ТОМАШЕК ....... 339
6.1. Введение................ 339
6.1.1. Принципы гель-хроматографии......... 340
6.1.2. Определения и основные понятия........ 341
6.2. Гели для хроматографии........... 347
6.2.1. Требования, предъявляемые к гелям....... 347
6.2.2. Декстрановые гели............ 349
Сефадекс G............... 349
Сефадекс LH-20.............. 351
6.2.3. Полиакриламидные гели.......... 351
6.2.4. Оксиалкилметакрилатные гели........ 352
6.2.5. Гели агарозы.............. 353
6.2.6. Другие гели.............. 356
Ультрагели............... 356
Полистирольные гели............ 356
Поливинилацетатные и полиэтиленгликолевые гели .... 360
Пористый силикагель и пористое стекло....... 360
6.3. Методика гель-хроматографии.......... 363
6.3.1. Оборудование, колонки, соединительные элементы и способы регулирования скорости потока ........ 363
6.3.2. Выбор геля.............. 366
6.3.3. Подготовительные работы.......... 367
Приготовление геля its-......... 367
Заполнение колонки ............. 368
Проверка правильности заполнения колонки и определение V0 369
6.3.4. Размеры колонок, величина пробы и скорость потока . . . 370 ( 6.3.5. Ввод пробы.............. 372
6.3.6. Восходящая гель-хроматография........ 373
6.3.7. Регенерация хроматографических слоев...... 374
6.3.8. Хранение гелей............. 375
6.3.9. Предохранение от микробной инфекции...... 376
6.4. Увеличение эффективной высоты колонки....... 377
6.4.1. Последовательное соединение колонок....... 377
6.4.2. Рециркуляционная хроматография........ 377
6.4.3. Прерывающаяся рециркуляционная хроматография . . . 378
6.5. Обработка экспериментальных данных....... 379
6.6. Применение гель-хроматографии......... 381
6.6.1. Обессоливание и групповое разделение....... 381
6.6.2. Фракционирование смесей.......... 383
6.6.3. Определение молекулярных масс........ 387
Литература..........,..... 390
2том
Глава 7. Аффинная хроматография. Я. ТУРКОВА......405
7.1. Введение................405
7.1.1. Выбор нерастворимого носителя........407
7.1.2. Выбор и связывание аффинного лиганда......409
7.1.3. Условия сорбции и элюирования........412
7.2. Нерастворимые носители для аффинной хроматографии . . . 413
7.2.1. Полидекстрановые носители и их производные .... 413
Обзор производных и их характеристика.......413
Химия связывания.............414
Устойчивость агарозных гелей и работа с ними.....416
7.2.2. Методики связывания аффинанта с агарозой и ее модификациями ................416
Связывание аффинного лиганда с сефарозой, активированной
бромцианом ..............
Триазиновый метод связывания аффинанта с агарозой
Модифицированные производные агарозы.....
Промышленные! реагенты—CNBr-активированная сефароза 4В АН-сефароза 4В и СН-сефароза 4В.......
7.2.3. Полиакриламидный и оксиакрилметакрилатный гели
Полиакриламидные производные .........
Методы получения производных акриламидных гелей и присоединения к ним аффинных лигандов.........422
Стабильность полиакриламидных гелей и их производных . . 424 Оксиалкилметакрилатные гели..........424
7.2.4. Целлюлоза и ее производные.........427
Химические реакции при связывании аффинных лигандов . . . 427
7.2.5. Другие носители............428
7.3. Промышленные аффинные лиганды, связанные с нерастворимым носителем................431
7.4. Применение...............433
7.4.1. Аффинная хроматография на производных агарозы . . . 433 Выделение куриного овоингибитора методом аффинной хроматографии на се;фарозе, связанной с химотрипсином .... 433 Выделение химотрипсина методом аффинной хроматографии на сефарозе, ковалентно связанной с метиловым эфиром е-аминокап-
роил-В-триптофана............. 43о
Дополнительные примеры применения агарозы и ее производных
7.4.2. Аффинная хроматография клеток на биогеле Р-6 со связанным гаптеном .....
•7 л о * . .
416 417 418
419 421 421
438
438 439
439
• .....г—-•'""«пил целлюлозы 440
Литература . .....
.............. 442
------- . ulllCnUJH.............
7.4.3. Аффинная хроматография на производных целлюлозы . • Очистка антител с помощью иммуносорбентов, полученных с при-
менением бромацетилцеллюлозы (ВАС)......•
Обзор применения производных целлюлозы
Глава 8. Автоматизация работы колонок в жидкостной хроматографии.
Б. МЕЛОУН.............. 445
8.1. Введение................ 445
8.2. Резервуары для элюента и гидравлические соединения . . . 446
8.3. Краны и насосы.............. 448
8.3.1. Краны............... 448
8.3.2. Насосы............... 449
8.4. Системы программирования и формирования градиента . . . 453
8.4.1. Системы формирования градиента........ 453
8.4.2. Полное программирование......... 460
8.5. Аппаратура для ввода образца, шприцы и хроматографические колонки................ 461
8.5.1. Системы ввода образца и шприцы....... 461
8.5.2. Типы современных хроматографических колонок . . . 464
8.5.3. Упаковка хроматографических колонок...... 466
8.6. Детекторы............... 467
8.7. Регистрация и обработка результатов........ 473
8.8. Расходомеры и коллекторы фракций........ 478
8.9. Более сложные системы и примеры комплексной автоматизации 480
Список иностранных фирм, выпускающих хроматографы . . 482
Литература................ 483
Глава 9. Тонкослойная хроматография. О. МОТЛ, Л. НОВОТНЫЙ 485
9.1. Введение................ 485
9.2. Аппаратура для ТСХ............ 486
9.2.1. Пластинки, приспособления для нанесения сорбентов, способы приготовления тонких слоев ........ 486
9.2.2. Хроматографические камеры и камеры для опрыскивания . 4S2
9.3. Твердые фазы для ТСХ............ 497
9.3.1. Силикагель.............. 497
9.3.2. Оксид алюминия............. 502
9.3.3. Силикат магния............. 503
9.3.4. Полиамиды.............. 503
9.3.5. Целлюлоза..............504
Ацетилированные целлюлозы.......... 505
9.3.6. Ионообменники............. 506
9.3.7. Материалы для гель-хроматографии....... 509
9.3.8. Другие сорбенты............ 509
9.4. Элюенты для ТСХ............. 510
9.5. Методика ТСХ.............. 512
9.5.1. Нанесение проб............. 512
9.5.2. Выбор элюирующих систем и методы элюирования . . 513 Специальные методы.элюирования......... 515
9.5.3. Обнаружение............. 517
Физические методы обнаружения......... 517
Химические методы обнаружения......... 518
Биологические методы обнаружения........ 518
Комбинированные, методы обнаружения..... 518
9.6. Количественное определение.......... 519
9.7. Препаративная тонкослойная хроматография...... 521
9.7.1. Приготовление слоев........... 522
9.7.2. Нанесение проб............. 523
9.7.3. Элюирование хроматограмм......... 523
9.7.4. Обнаружение............. 52J
9.7.5. Выделение соединений........... Ь24
536
536 538
9.7.6. Преимущества препаративной ТСХ....._ 524
9.7.7. Сухая колоночная хроматография....... 524
Заполнение колонок............. 524
9.7.8. Перенос условий ТСХ на колоночную хроматографию . . 525 9.8. Примеры применения ТСХ........... 527
9.8.1. Разделение олефинов на силикагеле, пропитанном солями серебра............... 527
9.8.2. Разделение и количественный анализ триглицеридов пальмового масла.............. 528
9.8.3. Одновременное разделение смеси шестнадцати аминокислот
на пленках с ионообменным слоем....... 529
9.8.4. Определение молекулярной массы гель-хроматографией 530
9.8.5. Разделение антибиотиков типа тетрациклина .... 532
9.8.6. Разделение гестагенов........ . . . 533
9.8.7. Разделение неорганических анионов на слоях оксида алюминия ................ 534
9.8.8. Неразрушающее визуальное обнаружение изопреноидных хинонов после разделения методом обращенно-фазной ТСХ 535
9.8.9. Разделение моно- и олигосахаридов на тонких слоях целлю-: лозы...............
9.8.10. Разделение пенициллинов с очень близкими структурами методом распределительной ТСХ........ 536
9.8.11. Количественный анализ токоферолов...... 538
9.8.12. Разделение винкалейкобластина, лейкокристина, лейрозина и лейрозидина методом ТСХ......... 538
9.9. Основные обнаруживающие реагенты для БХ и ТСХ .... 539
А. Неспецифические обнаруживающие реагенты..... 539
Б. Групповые обнаруживающие реагенты....... 543
Спирты................ 543
Алкалоиды............... 543
Аминокислоты, алифатические и ароматические амины . . . 543
Сахара................ 544
Фенолы................ 546
Соединения фосфора ............ 547
Гетероциклические соединения.......... 547
Нитросоединения............. 547
Органические кислоты............ 548
Карбонильные соединения........... 548
Серусодержащие соединения.......... 548
Стероиды............... 548
«, tt-iQ
Терпены................ О4У
Список иностранных фирм, выпускающих хроматографы . . 549
Литература................ 550
Глава 10. Газовая хроматография. Р. КОМЕРС, М. КРЕИЧИ ... 553
Список обозначений............. 553
10.1. Введение............... 554
10.1.1. Открытие газовой хроматографии....... 554
10.1.2. Основы теории газовой хроматографии...... 554
Основные соотношения, характеризующие удерживание . • "6
Размывание хроматографических зон........ °60
10.2. Приборы................ 565
10.2.1. Газ-носитель............. 567
10.2.2. Ввод образца............. 56»
10.2.3. Хроматографические колонки........ ?69
10.2.4. Термостат....... *7П
10.2.5. Детекторы.............. 570
Детектор по теплопроводности (катарометр)...... 573
Весы Мартина.............. 576
Ионизационные детекторы........... 577
Пламенно-ионизационный детектор........ 578
Гелиевый детектор............. 579
10.2.6. Хроматографические самописцы........ 580
10.3. Предварительная подготовка.......... 580
10.3.1. Неподвижная фаза........... 580
10.3.2. Твердые носители для неподвижной фазы..... 587
10.3.3. Приготовление колонок.......... 591
10.3.4. Нанесерие неподвижной жидкой фазы (НЖФ) на внутрен-
. нюю поверхность капиллярных колонок...... 592
10.3.5. Подготовка образца........... 594
10.4. Качественный анализ............ 596
10.4.1. Идентификация компонентов смеси по характеристикам удерживания............. 596
10.4.2. Относительное удерживание и индексы удерживания . . 601
10.4.3. Селективные детекторы.......... 605
Электронно-захватный детектор......... 606
Пламенно-ионизационный детектор со щелочным металлом . 608
Другие селективные детекторы.......... 610
10.4.4. Газохроматографический анализ в сочетании с масс-спектро-метрическим и другие специальные методы..... 611
10.5. Количественный анализ........... 613
10.5.1. Возможные источники ошибок........ 613
10.5.2. Оценка хроматографических кривых....... 614
10.5.3. Определение не полностью разделенных пиков . . . . 617
10.5.4. Количественная оценка хроматограмм...... 618
10.6. Программирование температуры......... 622
10.6.1. Причины использования.......... 622
Ш.6.2. Методики и применение.......... 623
10.7. Другие примеры применения газовой хроматографии . ; . 625
10.7.1. Измерение изотерм адсорбции ........ 625
10.7.2. Определение теплоты адсорбции........ 626
10.7.3. Измерение удельной поверхности адсорбента .... 627
10.7.4. Хроматография продуктов пиролиза....... 629
Техника пиролиза ............. 631
Факторы, влияющие на пиролиз......... 632
Основные области использования ......... 633
10.7.5. Анализ следов методом газовой хроматографии . . . 633
Непосредственные методы........... 634
Обогатительные методы........... 635
10.8. Примеры использования........... 637
10.8.1. Анализ газов и некоторых соединений, играющих важную
роль в окружающей среде......... 637
10.8.2. Анализы органических и биологически важных соединений 643 Литература................ 643
Глава 11. Противоточное распределение. 3. ПРОХАЗКА .... 652
11.1. Введение............... 652
11.1.1. Экстракция в системах жидкость — жидкость .... 652
11.1.2. Принципы противоточного распределения..... 653
11.1.3. Константа распределения.......... 654
11.2. Периодическое противоточное распределение (метод Крейга) . 656 11.2.1. Основная методика (методика Крейга)...... 656
противоточного распределения
... 11.3.2. 11.3.3. 11.3.4. 11.3.5. 11.3.6.
11.2.2. Характеристики
11.2.3. Аппарат
11.3. Варианты методов противоточного распределения 11.3.1. Способ рехроматографирования ......
Способ однократного извлечения .....
«Жесткий» способ разделения ......
Метод двойного извлечения .......
Метод О'Киффа [7, 14] ........
... Способ Ватанабэ — Морикавы [22] .....
11.4. Факторы, влияющие на противоточное распределение
11.5. Аналитическое применение противоточного распределения
11.6. Препаративное применение метода ......
11.7. Непрерывные методы ......
11.8. Примеры методик противоточного распределения .
11.8.1. Обогатительное выделение одного компонента из сложной реакционной смеси в аппарате с 20 пробирками
11.8.2. Выделение чистого [2-О-метилтирозил]окситоцина (метил-окситоцин фирмы SPOFA) с помощью полностью автоматизированного аппарата для противоточного распределения [10]
Литература ... ........ .....
Глава 12. Электромиграционные методы. 3. ПРУСИК .....
12.1. Введение ................
12.2. Электрофорез ...............
12.2.1. Теория миграции ионов в условиях зонного электрофореза и электрофореза с подвижной границей ......
12.2.2. Непрерывный электрофорез в свободном потоке
12.2.3. Зонный электрофорез на бумаге ........
12.2.4. Зонный электрофорез на ацетатцеллюлозной мембране Приборы для электрофореза на ацетатцеллюлозных мембранах
12.2.5. Тонкослойный электрофорез .........
12.2.6. Гель-электрофорез ............
12.2.7. Гель-электрофорез при градиенте концентрации полиакрил-амида (ПГЭ) .............
12.2.8. Дискретный электрофорез в полиакриламидном геле, Основы метода ..............
Методика аналитического дискретного электрофореза в полиакриламидном геле .............
Обнаружение с помощью окрашивания полиакриламидного геля Обесцвечивание геля после дискретного электрофореза в полиакриламидном геле ..............
Методика обесцвечивания с помощью прибора конструкции Прусика .............
12.3. Изотахофорез ...........
12.3.1. Теория миграции ионов в условиях изотахофореза
12.3.2. Капиллярный изотахофорез ......
Качественный анализ .........
Количественный анализ .........
12.3.3. Препаративный изотахофорез ... . .
12.4. Изоэлектрическое фракционирование (фокусирование)
12.4.1. Теория изоэлектрического фракционирования ....
12.4.2. Изоэлектрическое фракционирование в жидкой среде
12.4.3. Изоэлектрическое фокусирование в полиакриламидном геле
12.5. Источник питания .............
12.6. Техника безопасности ............
12.7. Примеры применения электрофореза ........
657 661 663 665 665 666 666 668 670 670 672 673 673 674
674
676 678
679
679 683
683 685 689 693 694 696 698
699 700 700
702 707
708
709
710
710
712
714
715
717
718
718
719
723
724
727
728
12.7.1. Зонный электрофорез неорганических ионов в лигандных буферных растворах............ 728
12.7.2. Электрофорез аминокислот и пептидов ..... 731
Аминокислотные и пептидные карты........ 734
Зонный электрофорез диметиламинонафтилсульфонильных (DNS)
производных аминокислот........... 735
Разделение, аминокислот методом капиллярного изотахофореза 737
12.7.3. Электрофорез белков........... 740
Электрофорез белков на бумаге......... 741
Определение молекулярной массы белков методом электрофореза
в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата . . 744 Определение молекулярной массы белков с помощью электрофореза в полиакриламидном геле в линейном градиенте концентрации [90]................ 747
Препаративный изотахофорез гемоглобина человека . . . 748 12.7А. Электрофоретическое] разделение нуклеиновых кислот и их
фрагментов.............. 750
Двухмерное разделение нуклеотидов........ 751
Литература................ 753
Глава 13. Обзор литературы. О. МИКЕШ........ 756
13.1. Введение................ 756
13.2. Периодические издания............ 757
13.3. Монографии............... 757
A. Хроматография.............. 757
Б. Бумажная и распределительная хроматография..... 759
B. Жидкостная хроматография.......... 760
Г. Адсорбционная хроматография......... 761
Д. Ионообменная хроматография......... 761
Е. Ситовая хроматография........... 762
Ж. Аффинная хроматография.......... 762
3. Тонкослойная хроматография.......... 763
И. Газовая хроматография........... 763
К- Экстракционная хроматография......... 765
Л. Электрофорез.............. 765
Послесловие редактора перевода ........... 767
Предметный указатель......,...... 770
Цена: 300руб.
